В 1968 г. количество моделей компании Lamborghini увеличилось до трёх. Это были двухместный центральномоторный суперкар Miura, большое четырёхместное купе Espada и переднемоторное купе класса GT с посадочной формулой 2+2 - Lamborghini Islero. Последняя была представлена на Женевском автосалоне 1968 г. как замена Lamborghini 400 GT. Ламборгини назвал её в честь быка Эдуарда Миуры по имени Ислеро, который убил знаменитого матадора Мануэля Родригеса в 1947 г. Все три машины оснащались одним и тем же 3.9-литровым 24-клапанным двигателем V12 с шестью карбюраторами Weber, конструкции Джотто Биццаррини, а также 5-ступенчатой механической коробкой передач, независимой рычажной подвеской и дисковыми тормозами на всех колёсах.

Islero унаследовала у 400 GT трубчатую раму с колёсной базой 2546 мм, но кузов пришлось искать новый, поскольку ателье Touring, строившее кузова для 400 GT, закрылось в 1967 г. Тогда Ламборгини обратился к бывшему сотруднику Touring Марио Марацци, основавшему собственную кузовную фирму. В сравнении с ранними моделями Lamborghini Islero имела угловатую крышу, более просторный салон, улучшенную звукоизоляцию, всплывающие сдвоенные фары и задний бампер из двух половин, расположенных над фонарями. В первой серии 400 GT (1968-1969) двигатель выдавал 325 л.с., а у 400 GTS (1969-1970) - 350 л.с. Вторая серия также отличалась усиленными тормозами и подвеской, увеличенным воздухозаборником на капоте, обновлённой приборной панелью и дисками Campagnolo. В комплектацию Islero входили кожаная отделка интерьера, усилитель руля, кондиционер и электрические стеклоподъёмники. Объём продаж составил 225 единиц, в том числе 125 единиц 400 GT и 100 единиц 400 GTS.